Funktionelle Charakterisierung und Strukturvergleich der Proteine der CDC48p-Familie

Projektleitung und Mitarbeiter

Mittelgeber : DFG

Forschungsbericht : 1994-1996

Tel./ Fax.:

Projektbeschreibung

Ausfall des CDC48-Gens der Bäckerhefe bewirkt eine Arretierung des Zellzyclus mit einer großen Knospe, ungeteiltem Kern und einer abnormen Spindel. Das Gen des Säurehomologen VCP konnte trotz der großen Sequenzähnlichkeit (70% Identität auf Proteinebene) den Ausfall nicht komplementieren. Beide Proteine sind in der Interphase an cytoplasmatischen Vesikeln, vermutlich dem endoplasmatischen Retikulum, lokalisiert. In der Mitose wandert CDC48p in den Zellkern, VCP wird am Centrosom, dem spindelorganisierenden Organell, konzentriert. Untersuchungen von Proteinchimären aus CDC48p und VCP und von gezielt mutiertem CDC48p weisen darauf hin, daß für die Kernlokalisation eine Consensussequenz am Aminoterminus und ein phosphorylierbarer Tyrosinrest am Carboxyterminus benötigt werden. Gereinigtes CDC48p und VCP liegen als ringförmige Homohexamere mit einer ATPase-Aktivität vor, die durch N-Ethylmaleinimid hemmbar ist.

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